钙磷镁微量元素检验.ppt

钙指示剂除钙红外，还有依地铬黑T（红→蓝），钙黄绿素（黄→绿），紫红酸铵（红→紫）。钙红指示剂终点明显，不受血清镁干扰，镁在强碱性条件下生成Mg（OH）2↓，指示剂在强碱性条件下不稳定，加指示剂后应立即滴定。操作简便，无需特殊仪器设备，适合于基层医院，但终点判断人为误差较大，溶血、黄疸影响终点判断。第31页,共53页，2024年2月25日，星期天2.邻甲酚酞络合酮法（O-CPC）邻甲酚酞络合酮是一种金属络合染料，也是一种酸碱指示剂，在碱性溶液中能与钙和镁螯合，生成紫红色螯合物（吸收峰575nm），作钙测定时，加入8-羟基喹啉消除镁的干扰。第32页,共53页，2024年2月25日，星期天Mg2+＋8-羟基喹啉可溶性络合物Ca2+＋邻甲酚酞络合酮紫红色螯合物灵敏度很高，方法简便、快速、稳定，同时适于手工检测和自动化分析仪。试管、器皿如有微量的钙污染亦会引起误差，最好使用一次性试管，所有试剂置塑料瓶中保存。第33页,共53页，2024年2月25日，星期天3.甲基麝香草酚蓝法（MTB）血清钙在碱性溶液中与甲基麝香草酚蓝（MTB）结合，生成一种蓝色络合物，加入8-羟基喹啉消除镁干扰。显色稳定，线性范围大，溶血、黄疸无干扰。第34页,共53页，2024年2月25日，星期天4.离子选择电极法（ISE）此法迅速、简便、灵敏度高、重复性好，并可同时测定总钙和离子钙，离子钙测定最好用血清，不用抗凝剂，在急需检测结果时可用肝素抗凝。【正常参考值】成人总钙2.25～2.75mmol/L离子钙1.15～1.42mmol/L第35页,共53页，2024年2月25日，星期天OLUPMUS2700全自动生化分析仪

第36页,共53页，2024年2月25日，星期天磷钼酸还原法我国推荐的常规方法非还原法染料结合法紫外分光光度法黄嘌呤氧化酶比色测定法WHO推荐的常规方法CV—多元络合超微量测定法同位素稀释质谱法决定性方法原子吸收分光光度法等二、血清磷测定第37页,共53页，2024年2月25日，星期天磷钼酸还原比色法在强酸条件下，无机磷酸盐与钼酸盐反应，形成非还原性磷钼酸复合物。在340/480nm的吸光度与标本中无机磷的浓度成正比。第38页,共53页，2024年2月25日，星期天1.磷钼酸法以三氯醋酸沉淀蛋白，在无蛋白滤液中加入钼酸铵试剂，与无机磷结合成磷钼酸，再以硫酸亚铁为还原剂，还原成钼蓝。（NH4）6Mo7O24＋3H2SO4＋4H2O7H2MoO4＋3（NH4）2SO412H2MoO4＋H3PO412MoO3·H3PO4＋12H2O12MoO3·H3PO4＋还原剂钼蓝第39页,共53页，2024年2月25日，星期天还原剂有很多种，1-氨基-2-萘酚-4-磺酸，应用历史较久，试剂不太稳定，显色时间长，灵敏度不高。氯化亚锡，灵敏度较高，颜色强度随显色时间时间而改变，偏离Beer定律。硫酸亚铁，显色较稳定。第40页,共53页，2024年2月25日，星期天2.孔雀绿直接显色法血清经浓尿素溶液稀释后，用孔雀绿-钼酸试剂显色，加入吐温-20使标准液与血清标本显色反应速度接近。灵敏度较高，但影响因素多，重复性差，显色不稳定。第41页,共53页，2024年2月25日，星期天3.酶法

①Gn＋H3PO4Gn－1＋G-1-PG-1-PG-6-PG-6-P＋NADP+6-磷酸葡萄糖酸＋NADPH②次黄苷＋H3PO4次黄嘌呤＋R-1-P次黄嘌呤＋H2O＋O2尿酸＋H2O2H2O2＋N-乙基-N