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多被银莲花总皂甙对人涎腺腺样囊性癌高肺转移癌细胞凋亡的影响-口腔临床医学专业论文.docx

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优秀毕业论文 精品参考文献资料 河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。本学 位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医 科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要 内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试验材料、原始数据、 申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否呗蜘承担相应法律责任。 ?,≯:≯~ 汝 研究生签名:≮群≯导师签章:矽和串二霉攀聩篱星羞篓釜 。I 攀馘赛鳓弘日 ’’:奇t~。∥。r’ 河北医科大学研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中 特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究 成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。 研究生签名: %瑞 导师签章: ’‘鬻≥年≥ 窦言月≥臼 万方数据 IUl IUl l I I III II I I III I l UI 目 录 Y27851 61 中文摘要 1 英文摘要 4 英文缩写 8 研究论文多被银莲花总皂甙对人涎腺腺样囊性癌高肺转移癌细胞凋亡 的影响 前言月lJ吾 ..9..9 材料与方法 1 0 结果皇日刁C ..1..1 8O 附图 20 附表 .25 讨论 .27 结j呛 30 参考文献 30 综述 多被银莲花的主要化学成分及药理作用 32 致谢 一39 个人简历 40 万方数据 中文摘要多被银莲花总皂甙对人涎腺腺样囊性癌高肺转移癌细胞凋亡 中文摘要 多被银莲花总皂甙对人涎腺腺样囊性癌高肺转移癌细胞凋亡 的影响 摘 要 目的:涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC), 是最常见的涎腺恶性肿瘤之一,该肿瘤具有侵袭性强、浸润性生长,早期 沿神经及血管向远处扩展和转移等特征。肿瘤常经血行转移至肺而严重危 害人类健康。目前寻找可口服、副作用小、可长期应用的抗肿瘤药物一直 是口腔医学界研究的热门课题之一。 多被银莲花(Anemone Raddeanin Regel,ARR)是中药毛茛科植物的 干燥根茎,药材味辛、热、有毒、归脾经,具有祛风湿、消肿痛之功效。 多被银莲花提取物总皂甙(Anemone Raddeanin Regel Extracts,ARRE)是多 被银莲花经水解和溶剂萃取而来。药理活性研究发现多被银莲花总皂甙有 抗肿瘤、镇痛、镇静及抗惊厥作用。多被银莲花总皂甙体外实验结果显示 水溶性总皂甙对兔脑cA_]V[P.PDE的生长具有明显的抑制效果,最高可达 61.3%。另有体外实验表明多被银莲花总皂甙能够明显抑制人癌细胞KB、 HCT-8、MCF.7/WT和MCF.7/ADR细胞株的生长。而在小鼠的动物实验 中多被银莲花总皂甙对肉瘤S180、肝癌H22和艾氏腹水癌EAC具有明显 的抑瘤效果,其抑瘤率分别达68.1%、62.5%、69.3%。 目前关于多被银莲花提取物总皂甙对腺样囊性癌癌细胞作用的研究 鲜有报道。本实验采用水解和溶剂萃取的方法,从中药多被银莲花中提取 分离得到总皂甙。通过对体外培养的人涎腺腺样囊性癌高肺转移株 (Adenoid cystic carcinoma of high pulmonary metastatic,ACC—M)经不同浓 度、不同时间的多被银莲花总皂甙处理后,采用MTT法、倒置相差显微 镜观察法、吉姆萨染色法、Annexin.V-FITC和PI双标记活细胞法检测细 胞凋亡情况,观察不同浓度、不同作用时间下多被银莲花总皂甙是否对 ACC—M细胞系有诱导凋亡作用。探讨中药对高肺转移腺样囊性癌细胞的 作用,为防治腺样囊性癌远处转移提供一种有效的方法和途径。 方法: 1材料 万方数据 中文摘要ACC 中文摘要 ACC.M细胞:北京大学口腔医院提供;多被银莲花总皂甙:购买于石 家庄乐仁堂药店(产地为黑龙江省),于河北医科大学药学院经溶解与溶 剂萃取提纯得到。 2方法 2.1实验药物的配制:多被银莲花总皂甙用含有二甲基亚砜(DMSO)的 RPMll640细胞培养液溶解配制成20mg/mL储存液,4。C保存,使用前用 培养液稀释(DMSO0.001%,对细胞无影响、)。 2.2 ACC.M细胞培养:在37℃、5%C02恒温箱及饱和湿度条件下培养, 10%胎牛血清和青霉素(100U/mL)、链霉素(100rtg/mL)加入至RPMll640 培养基中,24h--48h传1代,用O.04%EDTA和0.25%胰蛋白酶(1:1) 混合,其混合液用于消化传代。 2.3 MTT比色试验:参考细胞生长曲线,应用对数生长期的细胞制成
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