BDNF对脊髓空洞伴发脊柱侧弯兔神经功能治疗的实验研究.pdf

BDNF 对脊髓空洞伴发脊柱侧弯兔神经功能治疗的实验研究 脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor, BDNF)被归属 为神经生长因子家族(Nerve growth factor family, NGFf)成员,其生物学效应 十分广泛,可维持脑、脊神经节、大脑皮质、海马、纹状体发育中神经元的存活, 并支持体外培养的神经元的存活和神经突起生长,是神经元存活的依赖因子。本 实验应用免疫组化技术,观察BDNF 对兔脊髓空洞周围组织络氨酸激酶受体B (Tropomyosin receptor kinase B, TrkB)及神经营养素受体P75 的表达影响。 并进行感觉、运动功能评分。拟从新角度观察BDNF 对脊髓空洞伴发脊柱侧 弯的修复作用,并讨论BDNF 促进脊髓病变修复的可能机制。 目的：研究BDNF 治疗引起的空洞周围组织的影像学、分子生物学变化,观察 BDNF 干预后的感觉、运动功能变化,旨为BDNF 将来在脊髓空洞症中神经功能保 护应用及BDNF 可能存在的治疗价值做基础性研究。方法：1 在前期预实验基础 上,取50 只健康日本大耳兔行颈7 节段立体定位仪辅助下Kaolin 60ul 脊髓内注 射,制作非交通性脊髓空洞症模型。 2 建模前及建模后4 周、8 周、12 周行改良Tarlov 评分、痛温觉评分。3 建模后4 周、8 周、12 周行X 线、MRI 检查。 4 将成功建立的非交通性脊髓空洞伴发脊柱侧弯模型分为空白组、对照组与 治疗组。5 对照组及治疗组分别行立体定位仪辅助下颈7 节段损伤组织内注射 60u1 生理盐水及60ul BDNF(10ng/ml)。 6 干预治疗后4 周、8 周及12 周行改良Tarlov 评分痛温觉评分。7 治疗后8 周及12周使用技术及免疫组化染色技术检测BDNF 受体蛋白TrkB、P75 表达变化。 免疫组化结果使用计算机辅助的图像分析仪(Metamorph Image Sys-tem (4.6))进行定量分析。结果：1.至术后12周,在总共使用的50只实验动物中共 有30只可观察到脊髓空洞。 MRI显示空洞主要居于下颈段,有11只累及上胸段。空洞均表现为局限性中 央管扩张,大小不一。 30只中29只发生不同程度颈胸段脊柱侧弯。2.治疗组干预治疗后不同时间 点空洞组织周围TrkB、P75表达强于对照组及空白组。 3.治疗组干预治疗后不同时间改良Tarlo 评分明显优于对照组及空白组。 4.治疗组干预治疗后不同时间点痛、温觉评分明显优于对照组及空白组。 结论：1.BDNF干预治疗后在不同时间点可提高损伤组织周围TrKB、P75表 达。2.BDNF干预治疗后在不同时间点可明显改善实验动物运动、感觉功能。