GB/T 17812-1999饲料中维生素E的测定　高效液相色谱法.pdf

GB/l 前 言 饲料中维生素E的测定目前尚无国际标准，本标准是参照瑞士罗氏药品化学有限公司维生素研究 部发表的饲《料中维生素、类胡萝 卜— 现代分析方法》中“用高效液相色谱法测定配合饲料、预混合饲 料和浓缩维生素中的dl-a一生育酚”而制定的。在技术内容上参照该法，在编写格式上依据 GB/T1.1-1993标《准化工作导则 第1单元:标准的起草与表述规则 第1部分:标准编写的基本规 定》和GB/T1.4-1988标《准化工作导则 化学分析方法标准编写规定》。 为了使饲料中维生素E测定方法科学、准确、经济、实用，适合于我国不同实验室大量饲料样品的 测定，在参照国外分析方法的基础上增加了反相色谱测定条件。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草。 本标准主要起草人:陈必芳、赵小阳、李俊玲。 中华人民共和国国家标准 饲料中维生素E的测定 高效液相色谱法 GB/t17812 1999 DeterminationofvitaminEinfeeds High-pressureliquidchromatography 1 范围 本标准规定了饲料中维生素E的测定一一高效液相色谱法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混料、维生素预混料中维生素E的测定。检测范围为每 千克样品中含维生素E的量在1.IIU(dl-a一生育酚1mg)以上 2 弓!用标准 厂列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文 本标准出版时所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 用碱溶液皂化试验样品，去除脂肪，使试样中天然生育酚释放出来并水解，添加的生育酚乙酸Lib为 游离的生育酚。乙醚提取未皂化的物质，蒸发乙醚，用正己烷溶解残渣。提取物注入高效液相色Ai柱.用 紫外检测器在280nm处测定，外标法计算维生素E(dl-a一生育酚)含量 4 试剂和材料 除特殊注明外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，色谱用水为去离子水，符合GB/T6682 中用水规定 4.1 无水乙醚:无过氧化物。 4.1.1 过氧化物检查方法:用5mL乙醚加1mL100o碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游 离碘，水层呈黄色，或加0.500淀粉指示液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。 4.1.2 去除过氧化物的方法:乙醚用5%硫代硫酸钠溶液振摇，静置，分取乙醚层，再用蒸馏水振摇，洗 涤两次，重蒸，弃去首尾5%部分，收集馏出的乙醚，再检查过氧化物，应符合规定。 4.2 乙醇 4.3 正11,烷:重蒸馏(或光谱纯)。 4.4 1,-I-二氧六环。 4.5 甲醇:优级纯。 4.6 2,6一二叔丁基对甲酚(BHT) 4.7 无水硫酸钠 4.8 氢氧化钾溶液:500g/I。 国家质量技术监督局1999一08一10批准 2000一02-01实施 GB/r17812-1999 419 抗坏血酸乙醉溶液5川L;取。.5g抗坏血酸结晶纯品溶解于4ml温热的蒸馏水中用乙醇稀释 至100nli，临用前配制 4.10 维生*E(dl-a生,y酚)标准溶液 4.10.1dl-a一生育酚标准贮备液:准确称取dl-a一生育酚纯品油剂CUSP)100.0mg于100ml棕色容敏 瓶中，用正己烷溶解并稀释至刻度，混匀，4C保存，该贮备液浓度每毫升含维生素El.0mg 4.10.2dl-,一生育酚标准L作液 准确吸取dl-a一生育酚贮备液((4.10.1)用正己烷(4.3)按1;2。比例 稀释。若用反相色谱测定，将 1.00nil,dl-a生育酚标准贮备液代八 10ml棕色小容址瓶中.用氮气吹 干.用甲醇(4.5)稀释至刻度、混匀 再按比例稀释。配制上作液浓度为每皂升含维生素E50pg 4.11酚酞指示剂乙醇济液:10g/l。 4_12 氮气(纯度99.9i;,)。 5