第八章 注射用脑蛋白水解物.PDF

标准2 注射用脑蛋白水解物 Zhusheyong Naodanbai Shuijiewu Cerebroprotein Hydrolysate for Injection 本品系健康猪脑（见附1）经酶水解制得脑蛋白水解物溶液（见附2 ），加适宜辅料制成的 无菌冻干品。每瓶含总氮（N ）应为标示量的90.0 ％～110.0％，含总氨基酸（以氮计）应为总 氮的85％～100％，含肽（以氮计）应不低于总氮的20 ％。 【性状】 本品为白色至淡黄色疏松块状物或粉末。 【鉴别】 （1）取本品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中含氮约6mg的溶液，取2ml，加 双缩脲试液（取硫酸铜0.75g和酒石酸钾钠3.0g，加水250ml使溶解，在搅拌下加入10%氢氧化钠 溶液150ml，加水至500ml ）4ml ，应显紫红色。 （2 ）在含量测定游离氨基酸项下记录的色谱图中，供试品溶液色谱图中各氨基酸峰的保留 时间应与相应对照品峰的保留时间一致。 （3 ）取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中含氮约6mg 的溶液，作为供试品溶液。另精密 称取脑蛋白水解物对照品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含6mg的溶液，作为对照品溶液。 照高效液相色谱法（中国药典2015年版四部通则0512 ）测定。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充 剂（250mm×4mm，5μm）；以0.1%三氟醋酸溶液为流动相A ；以0.085 ％三氟醋酸乙腈溶液-0.1% 三氟醋酸溶液（80:20 ）为流动相B ，按下表进行梯度洗脱；流速为每分钟0.8ml ；检测波长为276nm 。 时间（分钟） 流动相A （% ） 流动相B （% ） 0 100 0 40 50 50 45 0 100 53 0 100 55 100 0 65 100 0 精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按中药色 谱指纹图谱相似度评价系统计算，供试品溶液的色谱图与对照品溶液色谱图的相似度（扣除色 氨酸峰后）不得低于0.9 。 【检查】酸碱度 取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中含氮约6mg的溶液，依法测定（中 国药典2015年版四部通则0631 ），pH值应为6.9～7.5 。 溶液的澄清度与颜色 取本品5瓶，分别加水溶解并稀释制成每1ml中含氮6mg 的溶液，依 法检查（中国药典2015年版四部通则0902和通则0901第一法），溶液应澄清无色；如显色，与 黄色8号标准比色液比较，均不得更深。 蛋白质 取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中含氮约6mg 的溶液，取5ml，加20%磺基水 杨酸溶液2ml，混匀，溶液不得出现浑浊。 高分子量物质 照分子排阻色谱法（中国药典2015年版四部通则0514 ）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用亲水改性硅胶为填充剂（TSK GEL 2000SWxl ， 300mm×7.8mm，5μm；或性能相当的色谱柱）；以三氟醋酸-乙腈-水（0.05:40:60 ）为流动相， 流速为每分钟0.7ml ；检测波长为214nm 。理论板数按核糖核酸酶A峰计算不得低于5000，各相 邻峰之间的分离度按峰高与峰谷之比计算均不得小于3.0 。 标准曲线的制备 取核糖核酸酶A （分子量13700）、胰岛素（分子量5808 ）、胸腺肽α1 （分 标准2 子量3108 ）、生长激素释放抑制因子（分子量1638）各适量，分别加流动相溶解并定量稀