微生物检验13学习课件.pptx
革兰阳性需氧杆菌
;
需氧芽胞杆菌属(Bacillus)48个种
与医学有关5个种
炭疽芽胞杆菌(B.anthracis)
蜡样芽胞杆菌(B.cereus)
蕈状芽胞杆菌(B.mycoides)
巨大芽胞杆菌(B.megaterium)
苏云金芽胞杆菌(B.thuringiensis);第一节炭疽芽胞杆菌
(Bacillusanthracis,B.anthraci);致病物质;所致疾病;乙类传染病
发生肺炭疽按甲类处理;形态染色:
致病菌中最大的G+杆菌,
两端平切、竹节状
有毒株可有明显荚膜;芽胞——椭圆形,小于菌体,位于菌体中央
多在有氧条件下形成,25~30℃,在培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中,都易形成芽胞
在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞,尸
体严禁解剖
;培养特性:
需氧或兼性厌氧,生长条件不严格,最适温
度30~35℃
普通培养基—扁平、粗糙、不透明、灰白色、
无光泽,边缘不整齐的菌落,低倍镜下菌落边
缘呈卷发状;BAP:12~15h不溶血,18~24h轻微溶血
其他需氧芽胞杆菌大多溶血明显而快速;肉汤—絮状沉淀生长
明胶—37℃18~24h表面液化成漏斗状,由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状。
NaHCO3BAP:
--有毒株—5%CO2、37℃24~48h、产生荚膜
呈黏液型菌落,挑取时呈粘丝状(鉴别要点)
--无毒株—粗糙型菌落
;生化反应:;抗原构造:
菌体多糖抗原:
--与毒力无关,耐热、耐腐败,长时间煮沸仍能与特异性抗体发生环状沉淀反应(Ascoli热沉淀反应)。
--特异性不高,能与其他需氧芽胞杆菌、14型肺炎链球菌、人A血型抗原发生交叉反应。;荚膜多肽抗原:
--与毒力有关,有抗吞噬作用,有利于细
菌生长和扩散
--荚膜肿胀试验,对本菌鉴定有意义
芽胞抗原:
有免疫原性和血清学诊断价值;炭疽毒素:
--保护性抗原(PA)、致死因子(LF)、水肿
因子(EF)三个组分
--单独皆无致病性,与PA结合才显示出致病性
--具有抗吞噬和免疫原性
;抵抗力:;--芽胞对化学消毒剂抵抗力不一,对碘和氧化
剂较敏感,常用以下方法杀菌:
1:2500碘10min、
3%H2O21h、
4%高锰酸钾15min、
0.5%过氧乙酸10min
--对磺胺、??霉素、链霉素、四环素、红霉素、
氯酶素均敏感;要求快速检出、分离鉴定病原菌,以利早期确诊、查清疫源、及时治疗和采取预防对策
;标本的采集与处理;无杂菌污染标本:直接接种肉汤增菌或固体培养基
污染杂菌固体标本:加10倍量生理盐水充分浸泡,振
荡10~15min、静置10min,取悬液65℃水浴30min或
85℃5min杀死杂菌,保留芽胞活性,再增菌和培养
污染杂菌液体标本:离心,弃上清液后,加0.5%洗涤
剂振荡10~15min,离心取沉淀物增菌和分离培养;生化反应;痰、呕吐物、CSF及炎症分泌物;涂片染色:
--G染色、荚膜染色、芽胞染色—初步报告
--荚膜荧光抗体染色
核酸检测:核酸杂交
分离培养:
--BAP、戊烷脒多粘菌素B平板
--2%兔血清肉汤增菌→分离培养;鉴定试验:
形态和菌落特征
生化试验:表11-1
串珠试验:
--接种于含青霉素(0.05~0.5U/ml)的肉汤
中,37℃6h,大而均匀成串的圆球状菌体
--与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关
--类炭疽无此现象;青霉素抑制试验:
接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板,
37℃24h
生长受抑制不生长
串珠和青霉素抑制联合试验:;噬菌体裂解试验:AP631炭疽噬菌体
NaHCO3毒力试验:
接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板,
10%CO2、37℃、24~48h
有毒株形成荚膜—黏液型菌落
无毒株不形成荚膜—粗糙型菌落
动物试验:
小鼠、家兔或豚鼠皮下接种;植物凝集素试验:
Ascoli热沉淀试验:可作追溯性诊断
;第二节蜡样芽胞杆菌
(Bacilluscereus,B.cereus);一、临床意义;夏、秋季多见
食物有米饭、乳品、禽畜肉类、果汁饮料等,大多为加热烹调过的熟食
在米饭中极易繁殖,由米饭受污染引起的食物中毒在国内、外均为常见
中毒食物大多无腐败、变质现象,感官性状正常,应引起注意;形态与染色:
-G