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微生物检验13学习课件.pptx

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革兰阳性需氧杆菌

;

需氧芽胞杆菌属(Bacillus)48个种

与医学有关5个种

炭疽芽胞杆菌(B.anthracis)

蜡样芽胞杆菌(B.cereus)

蕈状芽胞杆菌(B.mycoides)

巨大芽胞杆菌(B.megaterium)

苏云金芽胞杆菌(B.thuringiensis);第一节炭疽芽胞杆菌

(Bacillusanthracis,B.anthraci);致病物质;所致疾病;乙类传染病

发生肺炭疽按甲类处理;形态染色:

致病菌中最大的G+杆菌,

两端平切、竹节状

有毒株可有明显荚膜;芽胞——椭圆形,小于菌体,位于菌体中央

多在有氧条件下形成,25~30℃,在培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中,都易形成芽胞

在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞,尸

体严禁解剖

;培养特性:

需氧或兼性厌氧,生长条件不严格,最适温

度30~35℃

普通培养基—扁平、粗糙、不透明、灰白色、

无光泽,边缘不整齐的菌落,低倍镜下菌落边

缘呈卷发状;BAP:12~15h不溶血,18~24h轻微溶血

其他需氧芽胞杆菌大多溶血明显而快速;肉汤—絮状沉淀生长

明胶—37℃18~24h表面液化成漏斗状,由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状。

NaHCO3BAP:

--有毒株—5%CO2、37℃24~48h、产生荚膜

呈黏液型菌落,挑取时呈粘丝状(鉴别要点)

--无毒株—粗糙型菌落

;生化反应:;抗原构造:

菌体多糖抗原:

--与毒力无关,耐热、耐腐败,长时间煮沸仍能与特异性抗体发生环状沉淀反应(Ascoli热沉淀反应)。

--特异性不高,能与其他需氧芽胞杆菌、14型肺炎链球菌、人A血型抗原发生交叉反应。;荚膜多肽抗原:

--与毒力有关,有抗吞噬作用,有利于细

菌生长和扩散

--荚膜肿胀试验,对本菌鉴定有意义

芽胞抗原:

有免疫原性和血清学诊断价值;炭疽毒素:

--保护性抗原(PA)、致死因子(LF)、水肿

因子(EF)三个组分

--单独皆无致病性,与PA结合才显示出致病性

--具有抗吞噬和免疫原性

;抵抗力:;--芽胞对化学消毒剂抵抗力不一,对碘和氧化

剂较敏感,常用以下方法杀菌:

1:2500碘10min、

3%H2O21h、

4%高锰酸钾15min、

0.5%过氧乙酸10min

--对磺胺、??霉素、链霉素、四环素、红霉素、

氯酶素均敏感;要求快速检出、分离鉴定病原菌,以利早期确诊、查清疫源、及时治疗和采取预防对策

;标本的采集与处理;无杂菌污染标本:直接接种肉汤增菌或固体培养基

污染杂菌固体标本:加10倍量生理盐水充分浸泡,振

荡10~15min、静置10min,取悬液65℃水浴30min或

85℃5min杀死杂菌,保留芽胞活性,再增菌和培养

污染杂菌液体标本:离心,弃上清液后,加0.5%洗涤

剂振荡10~15min,离心取沉淀物增菌和分离培养;生化反应;痰、呕吐物、CSF及炎症分泌物;涂片染色:

--G染色、荚膜染色、芽胞染色—初步报告

--荚膜荧光抗体染色

核酸检测:核酸杂交

分离培养:

--BAP、戊烷脒多粘菌素B平板

--2%兔血清肉汤增菌→分离培养;鉴定试验:

形态和菌落特征

生化试验:表11-1

串珠试验:

--接种于含青霉素(0.05~0.5U/ml)的肉汤

中,37℃6h,大而均匀成串的圆球状菌体

--与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关

--类炭疽无此现象;青霉素抑制试验:

接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板,

37℃24h

生长受抑制不生长

串珠和青霉素抑制联合试验:;噬菌体裂解试验:AP631炭疽噬菌体

NaHCO3毒力试验:

接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板,

10%CO2、37℃、24~48h

有毒株形成荚膜—黏液型菌落

无毒株不形成荚膜—粗糙型菌落

动物试验:

小鼠、家兔或豚鼠皮下接种;植物凝集素试验:

Ascoli热沉淀试验:可作追溯性诊断

;第二节蜡样芽胞杆菌

(Bacilluscereus,B.cereus);一、临床意义;夏、秋季多见

食物有米饭、乳品、禽畜肉类、果汁饮料等,大多为加热烹调过的熟食

在米饭中极易繁殖,由米饭受污染引起的食物中毒在国内、外均为常见

中毒食物大多无腐败、变质现象,感官性状正常,应引起注意;形态与染色:

-G

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