用显微注射方法分析牙鲆肌肉发育调节基因MyoD_Myf5的启动子序列.pdf

用显微注射方法分析牙鲆肌肉发育调节基因 M y oD , M y f 5 的 启动子序列 1 ,2 1 1 1 ,2 1 ,2 1 张玉青 ,谭训刚 ,张培军 ,孙 威 ,徐 芃 ,徐永立 ( 1. 中国科学院 海洋研究所 ,山东 青岛 26607 1 ;2 . 中国科学院 研究生院 , 北京 100039) ( ) 摘要 :克隆了牙鲆 P a ral icht hy s ol i v aceus 肌肉发育调节基因 M y oD 和 M y f 5 的启动子序列 ,分别为 608 bp 和 1 073 bp 。对序列进行分析发现 M y oD 和 M y f 5 的启动子含有参与肌肉发育调控的基因的结合位点 。将 M y oD 和 M y f 5 的启动子连接到 GF P 载体上 ,构建了重组质粒 M y oD PGF P 和 M y f 5 PGF P ,并注射到一 细胞或两细胞的斑马鱼胚胎 中 ,对这两个基因的启动子进行了瞬时表达研究 。结果表明 ,牙鲆 M y oD 和 Myf 5 的启动子可以驱动绿色荧光蛋白特异地在斑马鱼肌肉纤维中表达 ,因此牙鲆 608 bp My oD 和 1 073 bp M y f 5 的启动子包含着可以驱动 M y oD 和 M y f 5 正常表达的必需元件 ,它们是肌肉特异的 ,并且可以跨物 种行使其功能 。 ( ) 关键词 :肌肉发育 ;启动子 ;牙鲆 P a ral icht hy s ol i v aceus 中图分类号 :Q3 12 . 7 　　　　　文献标识码 :A 　　　　　文章编号 (2008) 03003 105 　　在胚胎发育过程中 ,肌肉发育是由一系列的细 细胞中 ,干扰素调节因子结合元件对于 M y f 5 表达 胞外和细胞内因子调控的。细胞外的信号分子包括 的下调是必需的[24 ] 。在斑马鱼中 ,一些体节特异的 Hedgeho g , Ho ggin , Wnt , Fibrobla st growt h fac 调控元件位于 - 6 . 2 kb ( - 6 2 16 bp/ - 1 bp ) 以内, tor s 以及 Bone morp ho genic p rot ein s 等 等 。而 并且可以驱动 M y f 5 肌肉特异表达的最短序列是 M RF , Pax3 , Pax7 是重要的细胞内调节因子[ 1～4 ] 。 - 82 bp / - 1 bp 区域[25 ] 。进一步的研究表明 ,斑马 M RF 家族 的 4 个基 因 , M y oD , M y f 5, M y og eni n , 鱼胚胎中 , - 82 bp / - 62 bp 框可以驱动 M y f 5 肌 M R F 4 是含有高度保守的碱性螺旋 - 环 - 螺旋结构 肉特异的表达而抑制非肌肉特异的表达[26 ] 。斑马鱼 域的转录因子[ 5 ] ,该结构域可以与广泛表达的 E蛋 中 ,M y f 5 基因的第一个 内含子中存在一个可以抑 白相互作用而形成异二聚体 ,该异二聚体可以结合