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DNAStar中文使用说明书.docx

发布:2019-01-26约3.33万字共42页下载文档
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DNAStar中文使用说明书 一、EditSeq 打开已有序列 我们从用苹果计算机打开“TETHIS21MA”和用W indows 打开 “tethis21.seq”开始。 假设序列的末尾有载体序列污染。我们在用EditSeq 打开序列的同时, 用Set Ends命令去除5’和 3 ’污染序列。 z 从文件菜单(FILE MENU),选择Open。 z 打开文件夹“D e m o S e q u e n c e s ”单击选定 单击位于对话框右下角的 序列“T E T H I S 2 1 ”。 z Set Ends 按 z ,点 钮。Set Ends被打开(如右)。 在5 ’框和3’框中键入 50和8 5 0 击OK。单击Open打开序列。 当EditSeq 窗口打开时,序列长度显示在右上角。通过“setting ends,” 现在你只有最初序列中的 80 1 b p 的片段。Se t En d s 选择在全部 Lasergene 应用程序中都可以使用。 2 寻找开放读框 在这入门的一部分中,我们将确定序列中最大的ORF,并翻译它。 z 从S EARCH MENU找到O RF,点 击打开会出现右边的对话框。 z 单击Find N ext 寻找第一个 ORF 的位置。 z 继续点击Find N ext 直到你把O RF的位置选定在位置183-455。ORF 的坐标会出现在EditSeq 窗口的顶端附近。 DNA 序列翻译 这一节中我们介绍如何翻译我们的ORF,不过任何序列中的读框内部分 翻译。如果你的选择是在三联码的读框内,三 联码指示棒显示为实心黑线(如左图)。如 果 都可以用下面的方法进行 3 你的选择是不在三联码的读框内,左边的箭头和右面的箭头显示向左或 向右移动一个bp,以使所选序列成为三的倍数。 z 选定ORF , 从GOODIES MENU r a n s l a t e )。 z 翻译的蛋白 菜单中选择 翻 译 (T 质序列出现在一 个新的未命 名窗口中(如右 图)。它是使用标准的遗传密码翻译的。 4 使用其它遗传密码 根据你的序列的来源,你可以选择使用非标准的遗传密码进行翻译等操 作。在这节中,我们将标准的遗传密码转换成Ciliate Macronuclear 密码 。 z 从GOODIES M ENU 菜单选择Genetic Codes 打开,子菜单显示如左。 z 单击“Ciliate Macronuclear”就实现了 遗传密码的转换,Ed i t S e q 现在使用的就 是Ciliate Macronuclear的遗传密码。 z 同样可以将遗传密码转换为其它类型。 遗传密码的编辑 这一节中我们修改C i l i a t e M a c r o n u c l e a z 从G OODIES MENU 菜单选 r 的遗传密码。 择E dit z 点击DNA z 单击任何要编辑的密码, z 密码子,单击Set Starts按钮。第二的遗传密码 Selected Code。这将打开右面的窗 口,窗口显示遗传密码是怎样翻译 DNA 和RNA 序列的。 如以DNA 形式展示密码, 按钮。 编辑时, 从其目前的位置拖到新氨基酸对应的位置则可。 如使用不同的启始 窗就会被打开,可以进行起始密码子选择。 5 z 就会变成绿色,而且 列的反向互补及反向转换 单击任何氨基酸(或者codon 位置),该密码子 旁边出现一个箭头,它就被设定为起始密码子了。如要去除,只需 单击它即可。如不保存,则单击取消;如要保存,单击保存为。 序 列的正确输入。 E N U 菜单,选反向互补序列(Reverse Complement), A S T 检索 下面的步骤可以用于反向测定的序 z 选定序列。 z 从G O O D I E S M 或者把序列颠倒过来(Reverse Sequence)命令,则被选定的序列 就被翻转互补或翻转过来了。 B L NCBI的B LAST服务器上对TETHIS21序列进行相似性比 z 数据库默 下面我们将在 较。注意为了进行BLAST 查找必须保证因特网的连接。如果你没有连接 因特网,跳过这部分,继续下一部分。 z 选定序,或者从EDIT菜单中选择S e l e c t A l l 。 z 从网络检索菜单(NET SEARCH MENU),选择BLAST 查找。BLAST 对话框就会出现。 程序默认为b l a s t n , 认是nr,参数转换请参照帮助。 z 单击OK开始查找。 6 z 寻找结果显示为两部 分(如下)。上边的部分是按可能性的顺序显示检索到的序列的名字, 下面的部分显示上面部分 具体结果。有关“sc o r e s 网点——h t t p : / / w w w 一般来说,更主要的
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