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从猪胚胎骨骼肌cDNA文库中分离、定位新基因并

分析部分基因的功能的开题报告

一、研究背景及意义

骨骼肌是哺乳动物中最主要的肌肉组织之一，它不仅能够提供身体

姿势的维持和运动的动力，同时也参与了许多生理生化过程，如能量代

谢、葡萄糖和脂肪酸代谢等。骨骼肌细胞内有数以千计的基因表达，其

中未知的新基因可能在维持骨骼肌的结构和功能方面发挥关键作用。

本研究通过筛选猪胚胎骨骼肌cDNA文库，分离、定位新基因，并

分析所筛选出基因的功能，意义在于：（1）拓展对猪骨骼肌基因组的认

识，（2）挖掘新的潜在基因在维持骨骼肌结构和功能方面的作用，（3）

为猪肉品质的改良提供基因工程的理论支持。

二、研究内容

1.筛选猪胚胎骨骼肌cDNA文库，建立文库测序图谱，挑选出一批

可能为新基因的序列片段。

2.通过基因组数据库对该序列进行BLAST分析，找出与已知骨骼肌

基因序列的相似度及注释信息，对其进行初步鉴定及分类。

3.利用原核表达系统、哺乳动物细胞表达系统构建重组质粒，表达

重组蛋白进行功能鉴定。

4.利用RNAi技术对所筛选基因的表达进行抑制，并观察其对骨骼肌

细胞增值、分化以及能量代谢等相关生理功能的影响。

三、研究方法

1.猪胚胎骨骼肌cDNA文库的构建和筛选；

2.重组质粒构建、哺乳动物细胞和原核表达系统的搭建及蛋白纯化；

3.细胞培养和转染技术；

4.RNAi技术的设计和实验操作；

5.PCR、Westernblot、免疫组化染色等实验方法。

四、预期结果

通过建立并筛选猪胚胎骨骼肌cDNA文库，成功分离、定位新基因，

并初步鉴定其在骨骼肌细胞中的功能。这将拓展新的基因资源，为猪肉

品质的改良提供新的基因工程方向。