Notch1蛋白高表达抑制破骨细胞增殖和分化.PDF

34 2 2016  4 华西口腔医学杂志 第 卷 第 期 年 月   West China Journal of Stomatology Vol.34 No.2 Apr. 2016 •121• Notch1蛋白高表达抑制破骨细胞增殖和分化 平依林 娄锋 杨肖 张平 口腔疾病研究国家重点实验室 华西口腔医院（四川大学），成都610041 [摘要] 目的 探究体外培养条件下Notch1蛋白高表达对细胞核因子κB受体活化因子配体（RANKL ）和巨噬细胞 集落刺激因子（MCSF ）诱导的骨髓源破骨细胞增殖分化的影响。方法 体外培养Rosa-notch1转基因小鼠骨髓间充质 干细胞（BMSCs ），采用RANKL和MCSF刺激BMSCs 向破骨细胞方向分化。培养至第3天，实验组和对照组分别转 染携带Cre重组酶和绿色荧光蛋白（GFP ）的重组腺病毒（Ad-Cre-GFP ）和携带GFP的重组腺病毒（Ad-GFP ），启 动实验组Notch1高表达，采用实时聚合酶链反应（RT-PCR ）检测Notch信号通路成分（Notch1 、Notch2 、Notch3 、 Notch4 、Delta1 、Delta3 、Delta4 、Jagged1 ）、靶基因（Hes1 ）mRNA表达量以及抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP ）在 诱导后mRNA 的表达量。采用TRAP染色法观察破骨细胞增殖分化情况。结果 TRAP染色显示实验组破骨细胞形成 数量明显少于对照组（P0.05 ）。与对照组相比，实验组Notch1 、Notch3 、Jagged1 、Delta3 、Hes1 mRNA表达量明 显增高（P0.05 ），TRAP的mRNA表达量明显降低（P0.05 ）。结论 Notch1高表达抑制RANKL和MCSF诱导的 破骨细胞增殖分化。 [关键词] Notch1 ； 破骨细胞； 骨髓间充质干细胞 [中图分类号] Q 257 [文献标志码] A [doi] 10.7518/hxkq.2016.02.003 Up-regulation of Notch1 inhibits proliferation and differentiation of osteoclast in vitro Ping Yilin, Lou Feng, Yang Xiao, Zhang Ping. (State Key Laboratory of Oral Diseases, West China Hospital of Stomatology, Sichuan University, Chengdu 610041, China) Correspondence: Zhang Ping, E-mail; pingzhang68@. [Abstract] Objective This study aimed to explore the effect of the up-regulation of Notch1 on osteoclastogenesis induced to osteoclasts by receptor activator for nuclear factor-κB ligand (RANKL) and macrophage colony-stimulating factors (MCSF) in vitro. Methods The bone marrow stem cells