刺激植物响应蛋白基因Epl1克隆、原核表达及功能初探.pdf

第40卷摇 第1期 北 京 林 业 大 学 学 报 Vol.40,No.1 2018年1月 JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY Jan. ,2018 鄄鄄 DOI:10.13332/ j.1000 1522 刺激植物响应蛋白基因Epl1克隆、原核表达及功能初探 1,2 1 1 1 1 2 遇文婧 摇 宋小双 摇 邓摇 勋摇 平晓帆摇 周摇 琦 摇 刘志华 (1.黑龙江省林业科学院,黑龙江 哈尔滨 150040;2.东北林业大学林学院,黑龙江 哈尔滨 150040) 摘要:揖目的铱研究刺激植物响应蛋白Epl1对木本植物山新杨的刺激响应功能,为开发新一代提高植物免疫的新型 诱导剂奠定基础。 揖方法铱从棘孢木霉ACCC30153菌株中克隆获得一个刺激植物响应蛋白基因Epl1,并进行序列 分析和原核表达,将获得的原核重组蛋白rEpl1与山新杨组培苗进行互作,初步探讨rEpl1蛋白对山新杨生长、生理 指标、以及生长和防御相关基因转录水平的影响。 揖结果铱刺激植物响应蛋白基因Epl1 的cDNA序列全长为417 bp,预测蛋白分子量12郾6kDa,属于Cerato鄄platanin家族;通过构建原核表达载体,成功获得重组蛋白rEpl1;在1滋g/ mL rEpl1诱导下,山新杨组培苗生长较快、根系旺盛,生物量明显增加,CAT活性在诱导第1d时为对照的3郾51倍, 可溶性糖含量和脯氨酸含量在诱导初期急剧积累;山新杨生长素基因LAX2/AUX 和水杨酸防御基因JAR2 的转录 水平分别在蛋白诱导2d和12h时达到峰值,分别为对照的873郾10 和388郾02倍。 揖结论铱Epl1基因的克隆、序列分 析和原核表达为进一步研究Epl1蛋白诱导植物系统抗病性提供了理论基础;重组蛋白rEpl1与山新杨组培苗互作 实验,初步Epl1蛋白能够刺激木本植物在生理及分子水平上的响应,从而促进生长,提高抗性。 关键词:刺激植物响应蛋白;原核表达;山新杨;抗病诱导剂 鄄鄄 鄄鄄 鄄鄄 中图分类号:S763郾1摇 摇 文献标志码:A摇 摇 文章编号:1000 1522(2018)01 0017 10 引文格式:遇文婧,宋小双,平晓帆,等. 刺激植物响应蛋白基因Epl1克隆、原核表达及功能初探[J]. 北京林业大 鄄鄄 学学报,2018,40(1):17 26. Yu Wen鄄jing,Song Xiao鄄shuang,Deng Xun,et al. Cloning,prokaryotic expression and function of theelicitingplantresponseproteinof Trichodermaasperellum[J]. Journal of Beijing Forestry University,2018, 鄄鄄 40(1):17 26. Cloning,prokaryotic expression and function of the eliciting plant response protein of Trichoderma asperellum 1,2 1 1 1 1 2