棉花愈伤组织DNA甲基化分析研究.docx

棉花愈伤组织DNA甲基化分析研究

目录

棉花愈伤组织DNA甲基化分析研究（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1棉花愈伤组织概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2DNA甲基化在植物生长发育中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3棉花DNA甲基化研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.1棉花愈伤组织培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.1.1培养基配方及优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1.2培养条件及周期．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.2DNA提取与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.2.1DNA提取方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.2.2DNA纯度鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.3甲基化检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

2.3.1甲基化特异性PCR．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

2.3.2甲基化定量分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.4数据分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.4.1数据处理软件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.4.2数据分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

3.1棉花愈伤组织DNA甲基化总体状况．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

3.2特定基因甲基化水平分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

3.2.1基因甲基化模式．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

3.2.2基因甲基化与基因表达的关系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

3.3甲基化与棉花愈伤组织发育的关系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

3.3.1甲基化对愈伤组织形成的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

3.3.2甲基化与愈伤组织生长速率的关系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

棉花愈伤组织DNA甲基化分析研究（2）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

1.2研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

1.3国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

2.1棉花愈伤组织培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

2.2DNA提取与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

2.3甲基化检测技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

2.3.1甲基化特异性PCR．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

2.3.2甲基化测序．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

2.4数据分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．