脑蛋白水解物注射液质量标准.pdf

附件3： 脑蛋白水解物注射液 Naodanbai Shuijiewu Zhusheye Cerebroprotein Hydrolysate Injection 本品为猪脑蛋白水解物溶液（供注射用）制成的灭菌水溶液，每1ml 中含总氮（N ）应 为5.49～6.71mg，含总氨基酸（以氮计）应为总氮的85％～100％，含肽（以氮计）应不低 于总氮的20 ％。 【性状】 本品为浅黄色澄明液体。 【鉴别】 （1）取本品2ml，加双缩脲试剂（取硫酸铜0.75g 和酒石酸钾钠3.0g，加 水250ml 使溶解，在搅拌下加入 10%氢氧化钠溶液 150ml，加水至500ml ）4ml ，应显紫红 色。 （2 ）在肽含量测定项下记录的游离氨基酸色谱图中，供试品溶液各氨基酸峰的保留时 间应与相应对照品峰的保留时间一致。 （3 ）精密称取脑蛋白水解物对照品适量，加水溶解并稀释制成每1ml 中约含总氮6mg 的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（中国药典2010 年版二部附录V D ）测定。 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（如：柱长250mm，内径4mm，粒径5μm）；以0.1% 三氟醋酸溶液为流动相 A ；以 0.085 ％三氟醋酸乙腈溶液－0.1%三氟醋酸溶液 （80：20 ） 为流动相B ，按下表进行梯度洗脱；流速为每分钟0.8ml ；检测波长为276nm 。 时间（分钟） 流动相A （% ） 流动相B （% ） 0 100 0 40 50 50 45 0 100 53 0 100 55 100 0 65 100 0 精密量取本品与对照品溶液各 20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按中药色谱 指纹图谱相似度评价系统计算，供试品溶液的色谱图与对照品溶液色谱图的相似度（扣除色 氨酸峰后）不得低于0.9 。 【检查】 酸碱度 应为6.9～7.5 （中国药典2010 年版二部附录ⅥH ）。 溶液的澄清度与颜色 取本品5 瓶，依法检查（中国药典2010 年版二部附录IX B 和 IX A 第一法），溶液应澄清无色；如显色，与黄色6 号标准比色液比较，均不得更深。 蛋白质 取本品5ml ，加20%磺基水杨酸溶液2ml，混匀，溶液应澄清。 高分子杂质 照分子排阻色谱法（中国药典2010 年版二部附录V H ）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用亲水高效体积排阻硅胶为填充剂（如：TSK GEL 2000SWxl，柱长 300mm，内径 7.8mm，粒径 5μm ；或性能相当的色谱柱）；以三氟醋酸- 乙腈-水（0.05 ：40 ：60 ）为流动相，流速为每分钟0.7ml ；检测波长为214nm 。理论板数按 核糖核酸酶A 峰计算不得低于5000，各相邻峰之间的分离度按峰高与峰谷之比计算均不得 小于3.0 。 标准曲线的制备 取核糖核酸酶A(分子量13700)、胰岛素(分子量5808)、胸腺肽α1(分 子量3108)、生长激素释放抑制因子(分子量 1638)各适量，分别用流动相溶解并定量制成每 1ml 中约含 1mg 的溶液作为分子量标准溶液。取上述标准溶液各20μl，分别注入液相色谱 仪，记录色谱图，重复进样的保留时间相对偏差均不得大于 2.0% 。以各峰的保留时间为横 坐标，分子量对数为纵坐标进行线性回归，相关系数不得小于0.99 。 测定法 取本品适量，加流动相稀释制成每1ml 中约含总氮1mg 的溶液，取20μl注入 液相色谱仪